■ 保存4℃ (避免凍結(jié))。 ■ 實(shí)驗(yàn)操作1. 將Legionella菌液于15,000 rpm (最高轉(zhuǎn)速) 4℃ 離心5min,棄上清液。2. Lysis Buffer for Legionella在使用前振蕩混勻。使用前,用移液器反復(fù)吸打以確保樹脂混合均勻,然后取50 μl添加至細(xì)胞沉淀中,輕微振蕩混勻后離心。3. 95℃溫育10 min。4. 輕微振蕩混勻之后于15,000 rpm (最高轉(zhuǎn)速) 4℃ 離心10 min。5. 冰中放置5 min。6. 回收上清液。一般情況下,DNA溶液的回收量大約為25 μl。* Lysis Buffer for Legionella中含有低濃度的凝膠,細(xì)胞裂解離心之后,會(huì)在樹脂上形成肉眼不可見(jiàn)的凝膠層。步驟5的處理能夠使凝膠層徹底凝固,所以在收集上清液時(shí)應(yīng)注意從DNA溶液層表面吸取,避免觸碰凝膠層。注意:使用本制品前請(qǐng)充分振蕩混勻,并且在使用前反復(fù)吸打混勻以確保樹脂均勻分布。如果槍頭堵塞,可以剪掉槍尖。 |